產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

瓊脂糖凝膠4FF是在瓊脂糖凝膠4B的基礎(chǔ)上經(jīng)過兩次交聯(lián)形成的高交聯(lián)基質(zhì)，微球的化學(xué)穩(wěn)定性及物理性能顯著增強(qiáng)，剛性增加，流速更快，使產(chǎn)品處理時(shí)間大大縮短。可用于生物大分子的凝膠層析。

1.外觀

本品為白色球狀凝膠,無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)肉眼可見雜質(zhì)。

2.理化指標(biāo)

*檢測(cè)條件： 層析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25℃, 流動(dòng)相為0.1mol/LNaCl

3.貯存

產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃（保存溶液為20% 乙醇），通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。用過的柱子貯存在4℃（20% 乙醇）。

4.注意事項(xiàng)

本品應(yīng)避免與氧化劑接觸，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中。運(yùn)輸中應(yīng)避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。

5.應(yīng)用

本產(chǎn)品具有很高的化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、較好的機(jī)械性能、可多次重復(fù)使用等特點(diǎn)，非特異性吸附低，回收率高，可用有機(jī)溶劑及1~2mol/L 的NaOH在位清洗，適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)，廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的凝膠色譜純化。

5.1裝柱

凝膠過濾介質(zhì)的使用對(duì)裝柱的要求較高，為了保證分離效果，一般通過柱子上加一個(gè)裝柱器來(lái)使分離柱裝滿凝膠，或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗(yàn)。以下過程為通用介質(zhì)裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子，可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊，接好管路。

（1）讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。

（2）選擇一根一定直徑的柱子，長(zhǎng)約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠（約為柱床體積的1.15倍），清洗掉20%乙醇，抽干，用緩沖液（按凝膠：緩沖液=3：1的比例）配成勻漿。

（3）將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無(wú)氣泡。

（4）用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。

（5）打開蠕動(dòng)泵，讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過，使柱床穩(wěn)定。用緩沖液平衡柱子，到柱床穩(wěn)定。

（6）最好用一個(gè)裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平，上好柱頭。

5.2平衡

讓緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。

5.3上樣

（1）樣品用緩沖液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理，再上樣。

（2）介質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的，分子量大的先流出來(lái)。

（3）上樣體積約為柱體積的1~2%，越小分離越好。

5.4洗脫

用緩沖液洗脫，洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。

5.5再生

一般用緩沖液洗到平衡，可再次使用。

5.6注意

在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候，始終要避免柱子流干氣泡進(jìn)入。若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。

5.7在位清洗

（1）對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用2M NaCl去除。

（2）對(duì)沉淀蛋白、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類，可用1M NaOH 去除。

（3）對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。

清洗完畢后，用至少3倍緩沖液平衡柱子。

5.8注意

在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候，要避免柱子流干氣泡進(jìn)入。

5.9去熱源

用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)。或用以下方法步驟去除：

（1）2倍柱體積的70%乙醇；

（2）2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5；

（3）1倍柱體積4M尿素；

（4）3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M Nacl；

以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。

5.10消毒

用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。

注意：上樣之前，樣品必須去除色素，否則色素會(huì)被吸附到填料上，影響填料的正常使用。

備注：產(chǎn)品信息可能會(huì)有優(yōu)化升級(jí)。請(qǐng)以實(shí)際標(biāo)簽信息為準(zhǔn)。

瓊脂糖凝膠4FF

瓊脂糖凝膠4FF