18101056239
產品簡介
是一種用于從小鼠外周血中分離中性粒細胞的試劑盒，其主要組成包括試劑A、試劑B、鼠紅細胞沉降液、紅細胞裂解液和細胞洗滌液等。 小鼠外周血中性粒細胞分離(Plus)試劑盒
產品分類
產品簡介：
同常規試劑盒相比，本試劑盒通過優化分離液相關成分，進一步提高了小鼠外周血中性粒細胞的分離純度，更適用于流式細胞儀分選等下游實驗操作。
產品組成：
試劑盒組分 | 規格 | 保存條件 |
試劑A | 200mL | 2~8℃ |
試劑B | 100mL | 2~8℃ |
鼠紅細胞沉降液 | 100mL | 室溫 |
紅細胞裂解液 | 100mL | 室溫 |
細胞洗滌液 | 200mL | 室溫 |
操作步驟：(僅供參考)
1、 沉降去除紅細胞：取新鮮抗凝血與血液稀釋液(注射用生理鹽水或1XPBS)及紅細胞沉降液按照1:1:1比例混勻，室溫下靜置30-40min后，可見紅細胞沉于試管底部，小心吸盡上清層(富含白細胞及血小板)用于后續細胞分離。
2、 樣本分離：在15mL離心管中先加入4mL試劑A，后將2mL試劑B沿管壁緩慢疊加（45°傾斜試管）于試劑A之上，形成梯度界面，將沉降后上清小心平鋪于分離液液面上方。（注意分離液與樣本總體積不能超過離心管的三分之二，否則會影響分離效果。）
3、 室溫條件下水平轉子600-1000g，25-30minutes(血液體積越大所需離心力越大,離心時間越長,最佳分離條件需摸索，離心最大轉速不超過1000g)。
4、 離心后，上層白膜層為單個核細胞層，下層白膜層為粒細胞層。
5、小心吸取粒細胞層至新的離心管中，加入10mL細胞洗滌液洗滌細胞。250g，離心10min（如有紅細胞污染可依據樣本體積加入適量紅細胞裂解液祛除污染）。
6、 棄上清，加入5mL細胞清洗液重懸細胞，250g，離心10min。
7、 棄上清，重懸細胞備用。
注意事項：
A.開封前顛倒混勻，本分離液為無菌產品，為延長分離液保存時間，請在無菌條件下啟封，避免微生物污染。
B.請根據實驗需要預先無菌分裝分離液試劑，并在其恢復至室溫（18℃~25℃）后使用，如室內溫度較低，可將分離液預熱。4℃或者是
溫度較低的條件下離心，可能會導致白膜層不清晰。
C.血液樣本最好為新鮮抗凝血（采血2h以內），為保持中性粒細胞的活性，應避免冷凍和冷藏。
D.稀釋血液或洗滌細胞，不可使用含Ca、Mg離子的緩沖液及培養液，其成分會導致血細胞凝集，大大降低細胞得率及純度。
E.部分塑料制品（如聚苯乙烯）因其帶有的靜電作用，可能會導致細胞掛壁，影響分離效果。
F.血液樣本的粘稠度或者是溫度差異，可能會影響分離效果，可以調節離心轉數和離心時間，摸索最佳的分離條件。
G.如果要進一步對分離的細胞進行培養，注意全程保持無菌操作，避免微生物污染。
小鼠外周血中性粒細胞分離(Plus)試劑盒
小鼠外周血中性粒細胞分離(Plus)試劑盒
當前位置：
上一個：
返回列表
標準品
