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談談細胞凋亡的效應機制
2020-10-28
今天來了解一下細胞凋亡的效應機制吧凋亡細胞的特征性表現,包括DNA裂解為200bp左右的片段,染色質濃縮,細胞膜活化,細胞皺縮,后形成由細胞膜包裹的凋亡小體,然后,這些凋亡小體被其他細胞所吞噬,這一過程大約經歷30-60分鐘,Caspase引起上述細胞凋亡相關變化的全過程尚不*清楚,但至少包括以下三種機制:1凋亡抑制物正?;罴毎驗楹怂崦柑幱跓o活性狀態,而不出現DNA斷裂,這是由于核酸酶和抑制物結合在一起,如果抑制物被破壞,核酸酶即可激活,引起DNA片段化。現知caspase...
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ELISA試劑盒的基本原理有這三條,你知道嗎?
2020-10-26
ELISA試劑盒因此含雜質較多的抗原也可選用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復性亦佳。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附聯絡的,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的效果于??蓪⒕郾揭蚁┌逑冉涀贤饩€照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時),以增加其吸附功能。例如,在檢查抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,ELISA試劑盒而廣泛的固相載體一般不能直接與核酸聯絡。換言之,包被就是抗原或抗體聯絡到固相載體表面的進程。當抗原決定簇...
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ELISA試劑盒洗滌的兩大方法
2020-10-14
洗滌雖不是一個反應步驟,但卻也決定著實驗的成敗。ELISA靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。重點分析:ELISA試劑盒洗滌的兩大方法一、浸泡式1.吸干或甩干孔內反應液;2.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);3.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;4.吸干孔內液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液...
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ELISA試劑盒在試驗過程中需要注意什么
2020-10-12
ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的試驗確診方法。盡管ELISA試劑盒的操作過程看似簡單,但沒做到位的話就會影響試驗的作用。所以在試驗過程中這幾點非常重要:1、重要的洗刷:不充分的洗刷會導致差異和高布景,從而帶來不抱負的試驗結果。假如未結合的材料殘留在微孔板中,那么它會添加布景噪音。有必要的話,可添加洗刷液中的鹽濃度,這會阻止非特異結合反響。假如布景過高,置疑洗刷不行時,能夠測驗添加洗刷次數。2、關鍵的關閉:關閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位...
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ELISA試劑盒的選購指南
2020-09-27
目前市場上的ELISA試劑盒質量參差不齊,如何去挑選適合自己的試劑盒就顯得特別重要,具體有以下幾點可供參考:一、特異性:ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關鍵組分,抗體對有關,若抗體對中之一為多抗,另一個必須為單抗,建議使用雙單抗。二、靈敏度:靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質的量的能力,用戶可根據自己樣本中待檢指標的量選擇合適的試劑盒,如果待檢指標量很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可選擇高敏的ELISA試劑盒。三、重復性:科學實驗講求重復性,一般ELISA試劑盒,其板內和板間...
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你知道緩沖液的原理嗎?
2020-09-25
當往某些溶液中加入一定量的酸和堿時,有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用,這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液(如HOAc與NaOAc),弱堿及其鹽的混合溶液(如NH3·H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液。由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用,是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時,H+離子基本上被A-離子消耗:所以溶液的pH值幾乎不變;當加入一定量強堿時,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。在緩沖溶液...
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胰蛋白酶消化液對細胞的分離效果與哪些因素有關
2020-09-23
在組織細胞的體外培養和原代細胞培養中的組織細胞分散(將組織塊制備成單個細胞懸液)和傳代細胞培養中,貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液.胰蛋白酶消化液一共有三種,分為胰蛋白酶-EDTA消化液(不含酚紅);胰蛋白酶-EDTA消化液(含酚紅);胰蛋白酶消化液(不含酚紅),可根據客戶的需要來選擇.其中,胰蛋白酶含量為0.25%(2.5g/L),EDTA含量為0.02%(0.2g/L).PBS為常用的不含鈣鎂的細胞培養用PBS.經無菌過濾,可直接使用.胰蛋白酶消化液對細胞的分...
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衣霉素的用途及作用機理講解
2020-09-23
衣霉素為放線菌產生的核苷酸抗生素(antibiotic)??梢种凭哂斜荒?envelope,含糖蛋白)的病毒的繁殖。作用機理是抑制合成糖蛋白糖鏈必需的擬脂(多萜醇,dolichol)中間產物的生成。又因為它可抑制在合成細菌細胞壁(cellwall)的肽聚糖或胞壁酸中必需的擬脂(細菌萜醇,多聚萜醇)中間產物的形成,所以顯示對革蘭氏陽性菌的抗菌性。z近,利用這種抑制擬脂中間產物形成的作用,來探索糖類復合物的活體合成及其功能。衣霉素用途:生化試劑。衣霉素為鏈霉菌屬Streptomy...