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  • 熒光定量 PCR 方法:探針法 VS 染料法?

    2025-10-22 熒光定量PCR又稱qPCR,是一項(xiàng)非常常見的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。熒光定量PCR熒光為基礎(chǔ)對核酸進(jìn)行定量分析,其應(yīng)用非常廣泛,可以用于檢測基因的表達(dá)量(RNA的豐度),驗(yàn)證表達(dá)譜芯片或轉(zhuǎn)錄組測序的數(shù)據(jù),確定病原體的載量,對片段的拷貝數(shù)(CNV)進(jìn)行分析,對基因進(jìn)行分型等等。大部分研究者主要的應(yīng)用是對基因的表達(dá)量進(jìn)行測定,其原理為通過監(jiān)控反應(yīng)體系中熒光強(qiáng)度的變化,記錄檢測熒光達(dá)到閾值時的循環(huán)數(shù)(Ct值)。從理論上說,起始模板量和Ct值密切相關(guān),因此我們通過判讀Ct值從而對樣本進(jìn)行...
  • HE染色的方法介紹及觀察

    2025-10-22 HE染色是組織切片染色的一種,有利于觀察組織的形態(tài)學(xué)特征。今天我來講講HE染色的方法步驟。首先,HE染色也和免疫組化一樣,需要將組織切片進(jìn)行脫蠟水化,所以步驟是這樣的:脫蠟之前需將玻片在烤箱中烤10分鐘(60度),然后按通風(fēng)櫥里溶液的順序,依次是二甲苯I浸泡10分鐘,二甲苯II浸泡10分鐘,二甲苯III浸泡10分鐘,無水乙醇I浸泡5分鐘,無水乙醇II浸泡5分鐘,90%乙醇浸泡5分鐘,80%乙醇浸泡5分鐘,75%乙醇浸泡5分鐘,之后轉(zhuǎn)移到蒸餾水中在搖床上搖5分鐘,換PBS搖5分...
  • 探秘常用溶液:實(shí)驗(yàn)里的 “幕后者” 如何發(fā)力

    2025-10-22 在實(shí)驗(yàn)室里,各類溶劑是科研人員的得力助手,雖“個頭”不大,卻發(fā)揮著巨大作用。今天,就讓我們一同了解一下實(shí)驗(yàn)室中的常用溶液。常用溶液的分類按溶劑性質(zhì)分類:(1)水溶液:以水為溶劑,是最常見的一類。像生理鹽水(0.9%氯化鈉水溶液),在生物實(shí)驗(yàn)中用于維持細(xì)胞的滲透壓,模擬人體生理環(huán)境;還有酸堿中和實(shí)驗(yàn)里用到的氫氧化-鈉水溶液、鹽酸水溶液等,用于調(diào)節(jié)反應(yīng)體系酸堿度。(2)有機(jī)溶液:溶劑為有機(jī)溶劑。例如乙醇溶液,常用于消毒,70%-75%濃度的乙醇能有效殺滅細(xì)菌;二氯甲烷在有機(jī)合成實(shí)...
  • 滿滿的干貨(三):質(zhì)粒DNA的提取,困難解決了嗎?

    2025-10-22 綜合前兩期的“滿滿的干貨(一)”和“滿滿的干貨(二)”,大家對于質(zhì)粒DNA的提取應(yīng)該會有一定程度的了解,那么在使用過程中,很多人覺得自己提取的質(zhì)粒效果還是很差,究竟是怎么回事呢?本期給大家在準(zhǔn)備了一些質(zhì)粒DNA提取時需要注意的事項(xiàng),這些結(jié)果包含了濃度偏高或低的原因及解決方案:原因及解決方案01質(zhì)粒濃度偏高存在RNA殘留:未充分消化RNA(RNaseA失效或未添加),導(dǎo)致A260值虛高。解決方案提取前一定要在溶液Ⅰ中加入RNaseA,如果已加完RNaseA的溶液Ⅰ在冰箱放置久了...
  • 抗體產(chǎn)品星推薦第三十三期|ActivAb™Anti-FASTK Polyclonal Antibody

    2025-10-22 絲氨酸/蘇氨酸激酶家族是一類通過磷酸化修飾調(diào)控細(xì)胞生命活動的關(guān)鍵蛋白激酶,廣泛參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝調(diào)控、細(xì)胞周期和應(yīng)激響應(yīng)等重要生理過程。該家族包含多個亞類(如AGC、CaMK、CMGC等),通過級聯(lián)反應(yīng)傳遞外界信號,其異?;罨c癌癥、神經(jīng)退行性疾病等密切相關(guān)。FASTK是該家族的特殊成員,定位于線粒體,兼具激酶活性和RNA結(jié)合能力,主要調(diào)控線粒體RNA代謝和基因表達(dá),在細(xì)胞能量代謝和凋亡調(diào)控中發(fā)揮獨(dú)特作用。本期為您推薦明星抗體K109635P,用來檢測FASTK的存在,再合適...
  • 蛋白預(yù)制膠的4大核心作用,讓實(shí)驗(yàn)效率翻倍

    2025-10-22 蛋白預(yù)制膠的4大核心作用,讓實(shí)驗(yàn)效率翻倍蛋白預(yù)制膠的核心作用蛋白預(yù)制膠是提前在工廠完成凝膠配制、聚合與包裝的即用型凝膠,專為SDS-PAGE(十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳)實(shí)驗(yàn)設(shè)計。它跳過了傳統(tǒng)手動配膠的復(fù)雜流程,核心作用圍繞“簡化操作、保障精度、提升效率、適配場景”展開,具體如下:(一)簡化實(shí)驗(yàn)流程,降低操作門檻傳統(tǒng)手動配膠需精準(zhǔn)稱量丙烯酰胺、Tris緩沖液等試劑,控制凝膠濃度、pH值,還需等待凝膠聚合(通常30分鐘以上),步驟繁瑣且易出錯。蛋白預(yù)制膠直接實(shí)現(xiàn)“開箱即...
  • 常用染色液-蘇木素

    2025-10-16 科研實(shí)驗(yàn),生化研究,動物標(biāo)記很多領(lǐng)域都需要用到染色液,染色液分門別類,目的不同,配制方法、使用原料不同有很多染色方法染色液。蘇木素是一種常規(guī)的染色方法,不同的原料搭配,不同配置方法會有不同用途的,下面介紹下Solarbio幾種常用的蘇木素染色劑。1、蘇木素/蘇木精(Hematoxylin):各種蘇木染色液配置原材料。(H8070)天然染料蘇木素是常用的染色劑之一,也是組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)中常用的染料之一,蘇木精是淡黃色到銹紫色的結(jié)晶體,難溶于冷水和乙-醚和甘油,易溶于熱水和...
  • 剛果紅染色法的原理及使用說明

    2025-10-16 剛果紅染色法特指用剛果紅將纖維素染色的方法。剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物,常用的剛果紅染色法有兩種。在剛果紅中加入氯化鈉可以可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去。剛果紅的原理:剛果紅篩選主要是根據(jù)菌落降解纖維素,可以形成降解圈,氯化鈉沖洗再烘干后可以讓降解圈看的更清楚,更易觀察、它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng).在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅染色后,再Nacl用漂洗,Nacl可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大...
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